Práctca No. 1-2

Práctica No. 1 – Medios de cultivo
Práctica No. 2 – Esterilización

Objetivo:
El objetivo de esta práctica es comenzar a conocer como se comienza a desarrollar la serie de procesos que nos llevan a un resultado, a conocer y utilizar mejor los materiales con los que vamos a trabajar el resto de las prácticas.

Introducción:
El medio de cultivo es la combinación sólida o líquida de nutrientes y agua. Usualmente incluye sales inorgánicas, carbohidratos y vitaminas y aminoácidos.

Desarrollo:
Empezamos por ponernos el equipo de bioseguridad, después fuimos por un vale de material y luego nos proporcionaron los sig materiales:

-vaso de precipitado
-espátula
-vidrio de reloj
-mechero de bunsen
-balanza granataria
-probeta graduada
-papel para mesa
-varilla de cristal
-matraz erlenmeyer
-medio de cultivo
-cajas petri
-agua destilada
-agua destilada
-embudo
-papel secante

Después de que nos dieron los materiales pesamos en la balanza granataria el vidrio de reloj.
Continuamos haciendo la regla de tres para determinar cuantos mililitros de agua y cuantos gramos debíamos usar para rehidratar 7 cajas petri.
Ya que determinamos el agua destilada y los gramos de polvo de medio de cultivo, mezclamos el agua y el polvo, se dejó reposar y luego se calentó hasta el punto de ebullición durante un minuto en el matráz erlenmeyer, y cuando enfrío un poco se taponeó con torundas de algodón y tape, se etiquetó debidamente y se metió al autoclave a esterilización. Siguiendo el método de esterilización por calor húmedo ya visto anteriormente.
Ya que salió del autoclave esterilizado, se vertió el líquido a las cajas petri cuidadosamente para evitar que se contaminara y se espero a que el líquido se volviera gelatina.
Se estivaron las cajas de toda la mesa, se etiquetaron con sus respectivos datos y se los entregamos al maestro.

Conclusión:Esta primera práctica nos ayudó a introducirnos un poco más realmente a lo que es el laboratorio y nos enseñó a tener precaución a la hora de trabajar con todos los materiales que utilizamos y a dividirnos el trabajo en equipo para lograr un mejor resultado aunque fuera más tardado de lo normal, con el tiempo y las prácticas que vayamos desarrollando más adelante se irá aumentando la velocidad en el trabajo hasta que el tiempo que demore sea el normal.
Es importante mencionar que la práctica no. 2 Esterilización se realizó con ésta, manejando el autoclave para esterilizar el medio de cultivo y siguiendo toda la técnica de esterilización por calor húmedo.

Indicaciones para desarrollar un medio de cultivo:

1-se debe solicitar en el laboratorio de análisis clínicos un formato para anotar los materiales que se utilizarán en la elaboración de un medio de cultivo.
2-el alumno debe tener su equipo de bioseguridad completo.
3-vestir la mesa de laboratorio con papel blanco.
4-1 o 2 personas del grupo deben verificar que esté activada la línea de gas LP. Para ello se deben conectar los mecheros y abrir las válvulas que se encuentran debajo de la mesa de trabajo.
5-una vez verificado el gas se habilita el equipo de esterilización “autoclave” el cual se le debe introducir agua destilada para llevar a cabo la esterilización a calor húmedo.
NOTA: ver técnica de esterilización en autoclave.
6-Desarrollo de la práctica: se debe pesar en la balanza granataria el contenido en gramos dependiendo de las cajas petri solicitadas siguiendo las indicaciones que contiene el medio de cultivo, se ocupa rehidratar el contenido de 5 o 7 cajas petri solicitadas, se mezclara en el contenido de agua destilada que se requiera.
El polvo se mezcla junto con el agua en el vaso de precipitado que anteriormente fue pesado en el vidrio de reloj. Para mezclarlo se utiliza una varilla de cristal como agitador cuidando que no queden grumos en las paredes del vaso de precipitado. Para facilitar ésta actividad puede utilizarse el matráz erlenmeyer de forma directa y al terminar la mezcla se deja en reposo como lo marca las indicaciones del bote.
7-se deben llevar los tiempos de trabajo y acomodarlos en un formato de bitácora de actividades la cual indica con este medio de cultivo y termina con la observación microscópica del mismo en la práctica 7.
8-una vez reposado el medio de cultivo se expone al fuego del mechero con un ligero muñequeo hasta dejar que se presente la ebullición, una vez presentada, se toma el tiempo de 1 min. De ebullición cuidando que este producto al hervir no se derrame ya que puede ocasionar quemaduras hasta de 2do grado.
NOTA: si el medio de cultivo se tira por negligencia tendrán cada uno de los integrantes 2 puntos menos en calificación.
Una vez que ya se dio la ebullición y el tiempo adecuado de 1 minuto, se deja enfriar y reposar para poderlo tapar con torundas de algodón muy cuidadosamente sin que éstas se vallan al interior del vaso, se cubren con cinta, se etiqueta con el numero de mesa, el nombre del medio de cultivo y la fecha, ya terminado éste proceso se introducen al auto clave para iniciar la esterilización del medio.
9-aplicar la técnica de esterilización del medio de cultivo, se retira el autoclave, se deja enfriar poniéndolo en el campo de esterilización de la mesa, el cuál esta a base de 2 mecheros, se deja enfriar y se preparan los materiales para el vaciado, vasos de precipitado y cajas petri. Para realizar el vaciado en las cajas petri se toma el vaso de precipitado, se esteriliza previamente la boquilla del mismo y una vez que este listo se le vierte el líquido del medio de cultivo que se depositara en cada caja petri.
Ya estando las cajas petri trasvasadas, se dejan semi tapadas para evitar que se forme vapor de agua en su interior.
Se taparan las cajas petri una vez que el alumno verifique que el piso del medio de cultivo sea sólido, ya cerrados se estivan, se etiquetan con los datos del medio de cultivo y se entregarán al encargado del laboratorio en forma invertida para su refrigeración. Si el producto elaborado se contamina en un promedio de 24, 48 y 72 horas quiere decir que no se tomaron las medidas adecuadas de esterilización, por lo que se deberá realizar todo el medio aplicando la sanción requerida en el laboratorio.