Práctica No. 3

Práctica No. 3 Siembras en medios de cultivo.

Objetivo:
El objetivo de ésta práctica es aprender a realizar una siembra en medios de cultivo realizados anteriormente utilizando saliva, muestra interdental, orina, agua de la calle, verduras y muestras de sangre.

Introducción:
Se entiende por siembra la operación que consiste en depositar un germen asépticamente en un medio de cultivo. Toda siembra debe adaptarse a los siguientes principios generales:
Practicarla en medios de cultivos favorables y previamente esterilizados.
Emplear instrumentos asépticos.
No contaminar ni destruir el inóculo
Depositarla asépticamente en los medios elegidos
Esterilizar los instrumentos empleados antes y después de cada operación.

Desarrollo:
Al igual que en la primera práctica nos pusimos nuestro equipo de bioseguridad, nos dieron el vale de materiales y lo que necesitamos fue esto:

5 a 7 cajas petri de medio de cultivo
Asa bacteriológica
Vaso de precipitado con 25 ml. De agua destilada
2 mecheros de bunsen
Papel para mesa
Masking tape
Torundas de algodón secas y con alcohol
Porta objetos

Después de que nos dieron los materiales y encendimos los mecheros para crear el campo estéril y poner todas las cajas petri en el centro procedimos a tomar la respectiva muestra que se requería para cada tipo de cultivo y la sembramos estriada, y dependiendo de cada muestra es el material que se utilizó para tomarla.
Al final de la siembra sólo tapamos las cajas, se estivaron de nuevo y se las devolvimos al maestro para esperar a que crecieran las bacterias.

Conclusión:
Esta práctica en sí no es difícil, pero se tiene que tener mucho cuidado al momento de tomar la muestra y en especial con la técnica de veno punción, no lleva mucho tiempo pero se requiere tener práctica para lograr hacerlo más rápido.

Indicaciones para desarrollar Siembras en medios de cultivo:

El alumno debe realizar una siembra en medio de cultivo en forma estriada, variada y aplicando el nombre de cada una de ellas de las que anteriormente se dieron en el salón.

Materiales:
Tubo cónico de plástico
5 a 7 cajas petri de medio de cultivo anteriormente habilitados
Asa bacteriológica
Vaso de precipitado con 25 ml de agua destilada
2 mecheros de bunsen
Papel para mesa de laboratorio
2 torundas de algodón con alcohol

Muestras para siembra:
Saliva
Muestra interdental
Orina
Agua preparada de la calle
Verduras
Muestra de sangre


-Técnica de extracción sanguínea:

Para ésta técnica se utilizan los sig materiales

Jeringa de 5 ml para extraer 2.5 ml
Torundas alcoholizadas
Torniquete

Se realiza asepsia y antisepsia del pliegue del brazo utilizando una torunda de algodón alcoholizada.
Los movimientos de limpieza son de arriba hacia abajo. Nunca se regresa porque contaminamos el área.
Una vez hecha la asepsia y antisepsia iniciamos la técnica de veno punción y para ello debemos manejar nuestra jeringa dándole un pequeño giro y posteriormente jalando el embolo hacia atrás y a su vez lo regresamos al fondo de la jeringa quedando lista para su uso.
Una vez lista nuestra jeringa y ya limpia la zona de pliegue se aplica el torniquete en la parte media del brazo para hacer presión y obtener una vaso dilatación del conducto sanguíneo, en el cuál se introducirá la aguja de la jeringa y ya estando dentro del vaso sanguíneo extraemos la sangre en cantidad del volumen de 2.5 ml
La cuál vaciaremos en el tubo con tapón rojo si anti coagulante, no se retira el tapón del tubo se introduce la aguja en el teniendo un vaciado rápido, se retira la jeringa del tubo y una vez tomado desde su extracción hasta el llenado del tubo registraremos lo que llamaremos tiempo de coagulación que es de 1 a 5 minutos y hasta 8 minutos.
Una vez coagulada la sangre dentro del tubo de ensaye retiramos el tapón y centrifugamos a 1500 revoluciones por 5 minutos, teniendo como resultado la precipitación del paquete sanguíneo por centrifugación a lo que llamaremos separación de paquete y plasma.
Una vez separado el paquete, trasvasamos el plasma, el cual es de amarillo pálido y que utilizaremos para realizar la siembra
NOTA: Esta técnica se utilizara nuevamente en la prueba No. 8 , se sembrara el líquido plasmático en medio de cultivo utilizando la técnica con varilla de cristal denominada siembra por dispersión.